General description

胶原酶D是通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干而从溶组织梭菌的培养物中制备的。

Specificity

胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。

Application

来自溶组织梭菌的胶原酶被广泛用于解聚多种类型的组织（如，肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤），以及用于建立原代细胞培养系统的单细胞悬浮液的制备。当细胞表面蛋白的功能性和完整性很重要时，推荐使用胶原酶D。来自Roche的
梭菌胶原酶已用于从多种类型的组织中进行细胞的制备，如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。^[1][2][3][4]然而，应根据经验确定每个批次的酶对破坏特定组织的适用性。

Features and Benefits

内含物
冻干粉，未灭菌

Unit Definition

来自Roche的胶原酶以Wünsch单位（在+25°C下每分钟用Wünsch底物形成μmol的产物）进行测定。
通常，胶原酶活性是以Mandl单位（在+37℃下5小时内从胶原释放的1 μmol亮氨酸）给出的。
不幸的是，两个活性单位之间没有统一的转换因子，因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染性蛋白酶的浓度，而这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂相对于粗制剂在Mandl单位中实际上具有更低的比活性。梭菌制剂通常具有约1:1800的转换因子（如某个特定批次的梭菌胶原酶所含有的约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg）。

Physical form

冻干粉，未灭菌。

Preparation Note

激活剂：Ca²⁺
工作浓度：0.5 - 2.5mg/ml
储存条件（工作溶液）：-15至-25°C
Roche建议仅重悬需要立即使用的冻干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了，所以要避免反复冻融。

抑制剂：
胶原酶抑制剂：EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-巯基乙醇
胶原酶不会被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂：TLCK
胰蛋白酶抑制剂：抑肽酶，胰蛋白酶抑制剂（蛋清，大豆）
酶活：
胶原酶活性：>0.15 U/mg (基于Wünsch) (+25°C, 4-苯基-偶氮苄基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染性酶活：胰蛋白酶，梭菌蛋白酶和总蛋白水解活性
胶原酶D具有正常至高的胶原酶活性，以及非常低的胰蛋白酶活性（通常<0.2单位/mg，BAEE作为底物）。

Reconstitution

在任何平衡盐溶液中重悬（如HBSS）

Other Notes

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。