GeneArt® 高阶遗传组装系统是一种高效试剂盒，用于同时且无缝地将多达 10 个 DNA 片段（总长度高达 110 Kbp）组装至任何载体中。该系统依赖于酵母菌高效吸收和重组 DNA 片段的能力。这大大减少了 DNA 的体外处理，无需酶处理（如限制性酶切和连接），同时还可精确融合 DNA 序列。该试剂盒包含来自酵母菌（包括酵母菌选择性培养基）的进行转化和纯化的物质，和用于正确克隆的质粒扩增的感受态大肠杆菌。 •简单有效—可在单个载体（长达 110 Kbp）内同时克隆多达 10 个 DNA 片段（含有您选择的序列）；无需限制性酶切、连接或重组位点 •精确高效—旨在使您能够以您所需的方向在您所需的位点克隆您所需的片段，并且可获得高达 90% 的正确克隆，并且不会留有额外序列 •灵活性—使用我们的线性载体、您选择的载体或者克隆预先存在的无末端同源性且无需进一步修饰的 DNA 片段 •免费工具—使用我们免费的基于网络的界面，逐步指导您完成项目，从而设计DNA寡核苷酸等 •多种应用—通过快速组合、添加、删除或交换 DNA 片段来简化多种合成生物学和分子生物学技术 对于限制大小的 1 至 4 个 DNA 片段的克隆，且如果您更喜欢体外方法，则请考虑使用 GeneArt® 无缝克隆和组装试剂盒（货号 A13288）。 轻松创建多种 DNA 片段的新特定构建体 GeneArt® 高阶遗传组装系统利用酵母菌（酿酒酵母菌）中的转化耦联重组 (TAR) 将预先存在的 DNA 片段或化学合成的寡核苷酸连接至单个重组分子。基于共享末端同源性连接 DNA 片段和线性化载体。如果两个片段之间不存在这种末端同源性，则可以与重组连接体、合成 DNA 寡核苷酸（可提供两个不相关 DNA 片段之间的末端同源性）一起“拼接"。该过程非常有效且无缝，组装后无额外序列。尽管已有证据表明其支持多达 0.5 Mb 和 50 个 DNA 片段，但该产品经过优化，适用于载体中的多达 110 Kb 和 10 个 DNA 片段。 简单的克隆验证 为尽量减少针对酵母菌所做的工作，重组酵母菌克隆采用简化的 10 分钟 DNA 提取方案。提取得到的组装分子量足以进行接合点的菌落 PCR 验证，以及对大肠杆菌细胞进行直接转化用于下游分析。试剂盒中包含了提取所需的专有裂解缓冲液和玻璃微珠。 选择克隆载体的注意事项 GeneArt® 高阶遗传组装系统需要具有高容量且与酵母菌和大肠杆菌兼容的穿梭载体（即 BAC-YAC 穿梭载体）。该产品中不包括克隆载体，但我们单独提供了一种被称为 GeneArt® pYES1L Vector with Sapphire Technology™（货号 A13287）的即用型线性克隆载体。您也可以