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VAHTSTM Total RNA-seq (H/M/R) Library Prep Kit for Illumina®适用于起始模板为0.1-1 μg的人、小鼠、 大鼠总RNA的链特异性转录组文库构建。与常规mRNA-seq文库构建不同的是,本试剂盒将rRNA (包括细胞质28S, 18S, 5S rRNA以及线粒体12S, 5.8S rRNA)从总RNA中去除,保留mRNA以及其它非编码RNA,可用于lncRNA等非编码RNA的分析。降解的RNA样本也可用本试剂盒进行文库构建。 在第二链cDNA合成时,掺入dUTP标记第二链; PCR前将标记的第二链模板用UDG酶消化,使得最终的测序信息都来自于第一链cDNA,从而保留了RNA的链方向性。测序后的数据分析可确定转录本是来自正义还是反义DNA链。
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